在高效液相色譜（HPLC）與超高效液相色譜（UHPLC）分析中，液相色譜C18預(yù)柱守護(hù)著昂貴的分析柱，攔截樣品中的顆粒物、強(qiáng)保留雜質(zhì)與基質(zhì)成分，延長(zhǎng)主柱壽命，保障分離效果的穩(wěn)定性。然而，不當(dāng)使用不僅無(wú)法發(fā)揮其保護(hù)作用，反而可能引入死體積、增加背壓，甚至污染系統(tǒng)。掌握科學(xué)、規(guī)范的使用方法，是讓
液相色譜C18預(yù)柱提升色譜系統(tǒng)整體性能的關(guān)鍵。
一、選型匹配
固定相匹配：
預(yù)柱填料必須與分析柱一致（如C18），避免因化學(xué)性質(zhì)差異導(dǎo)致峰形畸變或保留時(shí)間漂移。
粒徑與孔徑匹配：
預(yù)柱粒徑（如5μm）應(yīng)≤分析柱粒徑，孔徑（如120?）相同，確保流動(dòng)相與樣品兼容。
柱規(guī)格選擇：
內(nèi)徑：通常2.1mm或4.6mm，與分析柱匹配；
長(zhǎng)度：10-20mm，過(guò)長(zhǎng)增加背壓，過(guò)短保護(hù)不足。
二、安裝規(guī)范
位置選擇：
安裝于自動(dòng)進(jìn)樣器與分析柱之間，確保所有樣品先經(jīng)預(yù)柱過(guò)濾；
若使用柱溫箱，預(yù)柱應(yīng)與分析柱同溫。
連接方式：
使用零死體積接頭或預(yù)柱卡套，避免產(chǎn)生額外死體積，影響峰形；
接頭擰緊力度適中，防止過(guò)緊損壞螺紋或過(guò)松導(dǎo)致泄漏。
方向確認(rèn)：
預(yù)柱有明確流向標(biāo)記（→），必須與流動(dòng)相方向一致，不可反接。
三、使用前活化
目的：
去除預(yù)柱內(nèi)保存液（通常為有機(jī)相），潤(rùn)濕填料，確保良好潤(rùn)濕性。
步驟：
以低流速（如0.2mL/min）用強(qiáng)溶劑（如甲醇或乙腈）沖洗10-15分鐘；
再用初始流動(dòng)相平衡15-30分鐘，直至壓力穩(wěn)定、基線平穩(wěn)。
四、樣品處理
樣品前處理：
所有樣品必須經(jīng)0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾，去除顆粒物；
復(fù)雜基質(zhì)（如血清、組織提取液）建議進(jìn)行蛋白沉淀、液液萃取或SPE凈化，減少?gòu)?qiáng)保留雜質(zhì)。
進(jìn)樣量控制：
避免超載，通常≤20μL，防止預(yù)柱過(guò)早飽和。
五、運(yùn)行監(jiān)控
壓力監(jiān)測(cè)：
定期觀察系統(tǒng)背壓，若壓力異常升高（如上升>15%），提示預(yù)柱堵塞。
色譜性能：
若出現(xiàn)峰形拖尾、保留時(shí)間漂移或基線波動(dòng)，可能預(yù)柱污染或失效。
更換信號(hào)：
壓力持續(xù)升高，經(jīng)沖洗無(wú)效；
分離效果明顯下降，且排除其他原因。
產(chǎn)品分類
更新時(shí)間：2025-10-14 
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